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PCR基因細(xì)胞擴(kuò)增儀實(shí)驗(yàn)用水標(biāo)準(zhǔn)是什么

發(fā)布時間:2013-12-02 14:02:23作者:admin來源:未知點(diǎn)擊:3493

PCR基因細(xì)胞擴(kuò)增儀實(shí)驗(yàn)用水標(biāo)準(zhǔn)是什么
  PCR(Polymerase Chain Reaction),也稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一種分子生物學(xué)方面DNA的快速擴(kuò)增技術(shù),用于放大特定的DNA片段,也可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制,其擴(kuò)增效率之高就象核裂變的“鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”那樣,因而叫做聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。
  PCR技術(shù)通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個小時內(nèi)把特定的DNA量提高1000萬倍。PCR技術(shù)使分子生物學(xué)研究一下子獲得了突破,而且隨著PCR技術(shù)的日趨完善,PCR在人類社會生活中的應(yīng)用也越來越廣泛。
  比如,在醫(yī)院里檢驗(yàn)血液中的某種病毒,有時病毒量極少(例如有的艾滋病病毒攜帶者),通過傳統(tǒng)的檢查方法費(fèi)力又費(fèi)時,這時PCR技術(shù)也許就可以幫上忙。 可以先選定這種病毒DNA上的一段DNA,設(shè)計(jì)合適的引物DNA,然后通過PCR技術(shù)一擴(kuò)增很快就可以判斷出血樣中是否擴(kuò)增出了大量的DNA,如果是的 話,那么就說明血樣中帶有該種病毒了。
  比如說在“DNA指紋”中我們提到,科學(xué)家們只需要一根頭發(fā)甚至一個細(xì)胞就可以完成DNA指紋的鑒定工作,這里實(shí)際上就要采用PCR技術(shù),因?yàn)橐粋€細(xì)胞中的DNA含量實(shí)在太少了,人們根本不可能檢測到它的指紋;而通過PCR技術(shù)把這個細(xì)胞中的DNA片斷擴(kuò)增1000萬倍,這樣DNA量就足夠作指紋鑒定了。
  PCR方法不但有極高的靈敏度,而且可以同時一次做近百個擴(kuò)增反應(yīng),省時省力效率高。
  PCR技術(shù)有以下幾個特點(diǎn):
  1)被擴(kuò)增的DNA所需量極小,理論上講一個分子就可以用于擴(kuò)增了;
  2)是擴(kuò)增效率高,目的基因的量成指數(shù)形式擴(kuò)增,幾個小時就擴(kuò)增1000萬倍以上。
  現(xiàn)在PCR技術(shù)已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用于生命科學(xué)研究、食品衛(wèi)生、醫(yī)療、法醫(yī)及環(huán)境監(jiān)測等諸多方面!
  根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn),可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時熒光定量PCR儀四類。
  在PCR測試過程中,一般需要使用DEPC水,而DEPC水是吸出1ml放在1000ml雙蒸水中配成1‰DEPC水,放在1000ml容量瓶中靜置4小時備用。以前我一般使用雙蒸水。隨著實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的進(jìn)步,越來越多的實(shí)驗(yàn)室開始使用實(shí)驗(yàn)室超純水設(shè)備,實(shí)驗(yàn)室超純水制取的超純水幾乎不含離子和顆粒,干擾性降到*低。一般來說,我們使用電阻率為18.25M?/cm(25℃)的超純水,TOC建議在20ppb以下。
  目前,國內(nèi)用戶比較多的進(jìn)口品牌主要有Wealtec,伯樂,艾本德,TECHNE等,國產(chǎn)梯度PCR儀較*業(yè)的生產(chǎn)企業(yè)有西安天隆、北京六一等幾家*業(yè)的PCR生產(chǎn)企業(yè)。
 
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